БИОХИМИЧЕСКИЕ ПОКАЗАТЕЛИ КРОВИ МОЛОДИ КАРПА НА ФОНЕ ВВЕДЕНИЯ В РАЦИОН ЭКСТРАКТА КОРЫ ДУБА (QUERCUS CORTEX)

Аннотация. В статье представлены результаты исследований биохимических параметров крови молоди карпа на фоне введения в рацион экстракта коры дуба (Quercus cortex), пробиотического препарата «Соя-бифидум», антибиотика «Ципрофлоксацина гидрохлорид» в составе препарата «Антибак 250».

Ключевые слова: молодь карпа, глюкоза, ферменты, гематологические показатели.

Abstract. The article presents the results of studies of the biochemical parameters of the blood of juvenile carp against the background of the introduction into the diet of oak bark extract (Quercus cortex), the probiotic preparation "Soya-bifidum", the antibiotic "Ciprofloxacin hydrochloride" in the composition of the preparation "Antibac 250".

Key words: juvenile carp, glucose, enzymes, hematological parameters.

Проблема антибиотикорезистентности организма в настоящее время является одной из главенствующих. Сельскохозяйственным животным скармливают синтетические антибиотики для улучшения продуктивности, показателей роста, способности противостоять различным инфекционным заболеваниям. Но при постоянном, а также бесконтрольном применении антибиотиков их эффективность действия на животных снижается [4]. Кроме того, развитие резистентности к противомикробным препаратам и вероятность переноса генов устойчивости от животного к человеку вызывают все большую озабоченность, что влечет за собой отказ от кормовых антибиотиков [1].

Однако совсем отказаться от использования антибиотиков в кормлении животных и рыб нельзя. В последние годы возрастает интерес к препаратам биологического происхождения с аналогичной активностью [2, 5]. Растительные антибиотики или фитобиотики не токсичны, не вызывают аллергических, аутоиммунных заболеваний, оказывают положительное действие как на организм человека, так и рыб [3, 4].

Применение препаратов растительного происхождения в рыбоводстве не слишком распространено. Лекарственные препараты, полученные из растительного сырья, несмотря на сравнительно низкую выраженность фармакологической активности, в иных случаях могут оказать значительно более сильный эффект, чем их синтетические аналоги. Это в полной мере относится к препаратам, полученным из коры дуба, которая в своем составе содержит различные биологически активные соединения с антиоксидантной активностью (дубильные вещества, танины, галловая и эллаговая кислоты и др.) [9, 10].

Целью данного исследования явилось изучение влияния экстракта коры дуба в различных дозировках, пробиотического препарата «Соя-бифидум» и антибиотика «Ципрофлоксацина гидрохлорид» на биохимические показатели крови молоди карпа.

Материал и методика. Исследования проведены на кафедре биотехнологии животного сырья и аквакультуры Оренбургского государственного университета в условиях аквариумного стенда, состоящего из 6 аквариумов (V=300 л). Аквариумный стенд оснащен системой фильтрации и насыщения воды кислородом. Объектом исследований являлись годовики карпа, выращенные на предприятии ООО «Оренбургский осётр» (г. Оренбург). Для проведения исследования методом пар-аналогов сформированы 6 групп (n=20) молоди карпа, возраст – годовики; средняя живая масса – 37-38 г. По истечении подготовительного периода (7 суток) рыба переведена на условия основного учетного периода (35 суток), предполагавшего кормление контрольной группы основным рационом (ОР), I опытной группы – ОР совместно с экстрактом Quercus cortex в количестве 1 мг/кг от объема корма, II опытной группы – ОР совместно с экстрактом Quercus cortex в количестве 2 мг/кг от объема корма, III опытной группы – ОР совместно с экстрактом Quercus cortex в количестве 3 мг/кг от объема корма, IV опытной группы – ОР совместно с пробиотическим препаратом «Соя-бифидум» в дозировке 0,7 мл/кг корма, V опытной группы – ОР совместно с антибиотиком «Ципрофлоксацина гидрохлорид», в дозировке 100 мг/кг корма в составе препарата «Антибак 250».

В качестве основного рациона был использован корм КРК-110-1 производства ОАО «Оренбургский комбикормовый завод» (г. Оренбург).

Пробиотический препарат «Соя-бифидум» (свидетельство госрегистрации RU.77.99.11.003. Е.000449.01.12 от 13.01.12) производства ООО «НПФ «Экобиос» (г. Оренбург) содержит не менее 109 клеток Bifidobacterium longum.

В качестве антибиотика был использован препарат «Антибак 250», который в качестве действующего вещества содержит ципрофлоксацина гидрохлорид.

В исследовании была использована смесь веществ, выделенных из экстракта Quercus cortex и синтезированных химическим путем, в том числе 4-гидрокси-3-метоксибензальдегида (ванилин), 4-пропил-1,3-бензолдиол (пропилрезорцин), 4-(3-гидрокси-1-пропенил)-2-метоксифенол (конифериловый спирт), 7-гидрокси-6-метокси-2Н-1-бензопиран-2-он (кумарин), 2Н-1-бензопиранон-2 (скополетин), 3,4,5-триметилгидросифенол (антиарол).

Кормление подопытных карпов осуществлялось 3 раза в сутки полнорационным комбикормом в соответствии с существующими нормами. В ходе исследований суточную норму кормления определяли в количестве 3 % от массы рыб.

С целью изучения гематологических параметров проводился отбор крови согласно действующим методическим рекомендациям в начале и при завершении исследования [8]. Определение гематологических показателей крови осуществлялось с использованием автоматического гематологического анализатора URIT-2900 Vet Plus (URIT Medical, Китай) в ЦКП «Федеральный научный центр биологических систем и агротехнологий Российской академии наук». Для работы на анализаторе использованы стандартные наборы реактивов.

Статистический анализ проводили путем сравнения опытных групп с контрольной группой при использовании пакета программ Statistica 10.0 (Stat Soft Inc., США) и SPSS 19.0 программного обеспечения (IBM Corporation, США). Проверку соответствия опытных данных нормальному закону распределения проводили при помощи критерия согласия Колмогорова. Различия считались статистически достоверными при ????≤0,05.

Результаты исследований. Кровь является чувствительным и информативным индикатором состояния организма, быстро реагирующим на изменения экзогенных и эндогенных факторов. Морфологические и биохимические показатели крови могут служить маркером физиологического состояния организма рыб, характеризовать качество и количество питания, адаптивные способности рыб и ее стрессоустойчивость [2].

Для более полной характеристики общего состояния организма подопытных рыб было проведено биохимическое исследование сыворотки крови (таблица 1).

Изучение биохимических показателей позволяет получить дополнительные данные о физиологическом состоянии карпа. В наших исследованиях зафиксировано повышение содержания глюкозы в группах, получавших экстракт Quercus cortex, в I опытной группе - в 4,2 (Р≤0,001), во II – в 3,4 (Р≤0,001) и III – в 3,3 (Р≤0,001) раза по сравнению с контролем. Повышение содержания глюкозы свидетельствует об активных обменных процессах в организме рыб, повышению стрессоустойчивости [6].

Содержание креатинина во всех опытных группах было ниже по сравнению с контрольной группы. Во второй группе, получавшей экстракт Quercus cortex в дозировке 2 мг/кг корма, этот показатель имел минимальные значения (на 30 % меньше контроля).

Уровень мочевины в группах, получавших экстракт Quercus cortex в дозировке 1 и 2 мг/кг живой массы, а также в группах, получавших пробиотический препарат и антибиотик, оказался выше контроля на 18 %, 42 %, 42 % и 6 % соответственно. Однако данные различия оказались статистически недостоверными.

Содержание железа в крови карпа только в I опытной группе было выше контроля (в 3 раза). Содержание фосфора во всех опытных группах оказалось несколько ниже контроля.

Повышение активности аланинаминотрансферазы (АЛТ) наблюдалось во всех опытных группах, наиболее высокий показатель этого фермента был зафиксирован в IV опытной группе с достоверным превышением контроля на 48% (таблица 2).

Активность аспартатаминотрансферазы (АСТ) была ниже контроля только в группе, получавшей антибиотик (на 6 %). Активность фермента лактатдегидрогеназы (ЛДГ) во всех опытных группах превысила контроль. Максимальное повышение (на 67 %) отмечено в IV опытной группе.

Щелочная фосфатаза была ниже контроля во всех опытных группах. Минимальные значения – в IV опытной группе – на 37 % меньше контроля. Показатели p-амилазы в IV группе превосходили контрольную в 2,6 раза, в V – в 1,5 раза. Во II же группе p-амилаза была ниже контрольной на 44 %, а в III – в 1,9 раза.

Выводы. Полученные в результате исследований данные свидетельствуют о том, что введение в рацион молоди карпа экстракта Quercus cortex в трех дозировках, а также пробиотического препарата «Соя-бифидум» и антибиотика «Ципрофлоксацина гидрохлорид» не вызвало значительных отклонений биохимических показателей крови от физиологической нормы.

Наблюдалось высокое содержание глюкозы во всех опытных группах по сравнению с контролем. Повышение уровня активности некоторых ферментов (АСТ, ЛДГ) во всех опытных группах может быть связано с нарушением липидного обмена, происходящего в ряде случаев во время интенсивного роста и развития организма. Уменьшение активности щелочной фосфатазы и значительное повышение активности амилазы свидетельствует о положительном влиянии кормов на физиологический статус рыб, более активно протекающих обменных процессах [7].

Таким образом, использование в кормлении рыб в качестве растительного антибиотика экстракта Quercus cortex вполне допустимо.

Список литературы:

1. Багиров, В.А. Включение экстракта Quercus cortex в рацион бройлеров изменяет их убойные показатели и биохимический состав мышечной ткани / В.А. Багиров, Г.К. Дускаев, Н.М. Казачкова, Ш.Г. Рахматуллин, Е.В. Яушева, Д.Б. Косян, Ш.А. Макаев, Х.Б. Дусаева // Сельскохозяйственная биология. 2018. Т. 53. № 4. - С. 799-810.

2. Дускаев, Г.К. Разработка новых решений по управлению чувством кворума микробиома сельскохозяйственных животных и птицы / Г.К. Дускаев, Н.М. Казачкова, А.С. Ушаков // Инновационные направления и разработки для эффективного сельскохозяйственного производства: материалы междунар. науч.-практ. конф., посвящ. памяти чл.-корр. РАН В.И. Левахина: в 2-х ч. / под ред. проф. Ф.Г. Каюмова. Оренбург, 27-28 октября 2016 г. – Оренбург, 2016. Ч. I. – С. 163-165.

3. Жандалгарова, А.Д. Использование бактерийных препаратов «Ферм-км» и «Простор» в кормлении осетровых рыб / А.Д. Жандалгарова: диссертация на соискание канд. с.-х. наук. – М.: 2017. – 121 с.

4. Казачкова, Н.М. Влияние экстракта Quercus cortex на биохимические показатели крови цыплят-бройлеров / Н.М. Казачкова, С.В. Нотова, Г.К. Дускаев, Т.В. Казакова, О.В. Маршинская // Вестник мясного скотоводства. 2017. №4 (100). - С.213-219.

5. Казачкова, Н.М. Использование природных антибиотиков в рационе сельскохозяйственных животных и птицы / Н.М. Казачкова // Инновационные технологии в образовании и науке: сб. материалов Междунар. науч.-практич. конф. в 2-х т. – Чебоксары, 2017. Т.1. – С. 14-16.

6. Камышников, В.В. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике. - М.: МЕДПресс-информ, 2004. - С. 56–60.

7. Мирошникова, Е.П. Изменение гематологических параметров карпа под влиянием наночастиц / Е.П. Мирошникова, А.Е. Аринжанов, Ю.В. Килякова // Достижения науки и техники АПК. 2013. № 5. - С. 55-57.

8. Серпунин, Г.Г. Методы гематологических исследований рыб / Г.Г. Серпунин, Л.В. Савина. - Калининград: 2005. - 53 с.

9. Толмачева, А.А. Лекарственные растения и их компоненты как ингибиторы системы quorum sensing первого типа у бактерий / А.А. Толмачева: дис. … канд.биол.наук. - Оренбург, 2015. – 129 с.

10. Erdogan, Z. Effects of dietary supplementation of synbiotics and phytobiotics on performance, caecal coliform population and some oxidant/antioxidant parameters of broilers / Z. Erdogan, S. Erdogan, O. Aslantas, et al. // J Anim Physiol Anim Nutr (Berl) 2010;94(5):e40-e48.